谁知道DNA指纹技术应用（DNA指纹技术应用了什么原理）

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1、DNA指纹技术原理：一般要通过以下几点来完成：将送检的各种生物学检样，如毛发、血痕、精斑、人体组织或白骨等，把其中所含的DNAnbsp;提取出来。

2、选用与探针配对的限制性核酸内切酶，在长链DNAnbsp;位置上加以切割，使分子量很大的DNAnbsp;长链切短成许多长度不同的小片段。

3、在胶板尺寸较长的凝胶电泳仪中，对酶解完全后的DNAnbsp;片段进行电泳，各酶切片段就会按其长度大小在电场中进行分离。

4、先用碱性溶液使凝胶板中分离开的双链DNAnbsp;片段变性为单链片段，然后将凝胶板夹在尼龙膜中，使这些单链DNAnbsp;片段印溃(blot-ting)，转移并永久性地固定在尼龙膜上。

5、让放射性DNA探针与尼龙膜上的单链DNA片段进行分子杂交。

6、用放射性胶片与尼龙薄膜叠放，尼龙膜上的放射性探针便会发出Xnbsp;射线使胶片曝光，从而使杂交有探针的长度不同的DNA片段位置显影在胶片上。

7、这样的特征nbsp;DNA片段条状图谱，便是所谓的DNA指纹。

8、1nbsp;DNA指纹图的建立及发展nbsp;近百年来的研究认为，任何遗传分析都是以遗传标志为基础的，而任何一个遗传标志的价值又在于其变异nbsp;性(即多态性)的大小。

9、有关遗传多态性的研究对促进人类学、遗传学、免疫学以及法医学的发展，nbsp;以及对阐明某些疾病的发病机理乃至协助诊断等方面都起了十分重要的作用。

10、但以往的研究都是利用各种外部表现型、生理缺陷型、同工酶、多态蛋白等作为遗传标志，用间接分析来推论相应的遗传基因。

11、nbsp;70年代末，限制性内切酶和重组体DNA技术的出现以及分子生物学的飞速发展，使人们对遗传标志的研究转向DNA分子本身。

12、由于各种遗传信息都蕴藏在DNA分子上，生物个体间的差异在本质上是DNA分子的差异，因此DNA被认为是最可靠的遗传标志。

13、某些DNA序列的差异可通过限制性酶切片段长度的改变来反映，此即限制性片段长度多态性(restrictionnbsp;fragmentnbsp;lengthnbsp;polymorphisms,RFLP),其产生是由于点突变、DNA重排、插入或缺失引起的〔1〕。

14、随着对RFLP研究的深入，人们发现了基因组中最有变异性的一类序列——高变异DNA序列，使DNA遗传标志的发展和应用得到了一次飞跃。

15、nbsp;1980年，Wyman和White描述了第一个多等位性的具有高度多态性的人类DNA标志。

16、不久，在胰岛素基因(Insulingene)的5′端区域、致癌基因(C-Harasnbsp;Inbsp;Oncogene)的3′端分别发现了相同的高度可变的标志(hypervariablenbsp;marker)。

17、在α-球蛋白(α-globin)基因群周围还发现了其它三个标志〔2〕。

18、1982年，Bell等〔3〕证实：这些高度多态性区域串联着重复的短序列单位，重复单位数目的差异导致了这种高度的可变性，由于这些结构特征，人们称这些区域为小卫星(minisatellite)或高度可变区域(hypervariable)或可变数目的串联重复(variablenbsp;numbernbsp;ofnbsp;tandemnbsp;repeats)。

19、nbsp;1985年，Jeffreysnbsp;等〔4〕用肌红蛋白基因第一内含子中的串联重复序列(重复单位含33bp)作探针，从人的基因文库中筛选出8个含有串联重复序列(小卫星)的重组克隆。

20、序列分析表明，这8个小卫星重复单位的长度和序列不完全相同，但都有相同的核心序列(corenbsp;sequence)即GGCCAGGA/GGG。

21、他们先后用两个多核心小卫星(polynbsp;coreminisatenbsp;-llite)33.6和33.15探针进行southern杂交，在低严谨条件下杂交得到了包含10多条带的杂交图谱，不同个体杂交图谱上带的位置就象人的指纹一样千差万别，Jeffrey称之为DNA指纹(DNAnbsp;fingerprint)〔5〕，又名遗传指纹(geneticnbsp;fingerprint)。

22、nbsp;RFLPnbsp;DNA指纹分析技术由于方法繁杂、周期长、实验条件高等缺陷而无法大范围推广。

23、1990年，Williams等〔6〕首次报道了AP-PCR技术，Welsh和McCelland〔7〕亦独立地进行了这方面的工作，从而使DNA指纹技术应用更加广泛。

24、AP-PCR技术是采用随意设计的1个或2个引物，对模板DNA进行PCR扩增，一般先是在低严格条件，即在高Mg2+浓度(大于传统PCRnbsp;Mg2+浓度1。

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